新喋呤試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
通用名稱(chēng)：新喋呤試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱(chēng)：Neopterin ELISA
產(chǎn)品規(guī)格：96T
產(chǎn)品貨號(hào)：RE59321
產(chǎn)品品牌：德國(guó)IBL
新喋呤試劑盒預(yù)期用途
新喋呤試劑盒可用于體外診斷定量檢測(cè)人血清、血漿和尿液中的新喋呤含量。僅用于科研使用。
前言簡(jiǎn)介
新喋呤生物合成與細(xì)胞免疫系統(tǒng)的活性關(guān)系密切，據(jù)報(bào)道在病毒感染病人新喋呤升高，認(rèn)為升高源于直接防御病毒感染細(xì)胞的免疫應(yīng)答。已證實(shí)抗原刺激人外周血單核細(xì)胞可引起新喋呤釋放入細(xì)胞培養(yǎng)液中，人巨噬細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)受γ-干擾素刺激產(chǎn)生新喋呤。人體液中新喋呤水平的測(cè)定為細(xì)胞介導(dǎo)免疫的相關(guān)疾病監(jiān)測(cè)提供了一種有用和創(chuàng)新的工具。許多傳染病，新喋呤水平升高先于臨床表現(xiàn)和血清變化。通常樣本不會(huì)進(jìn)行所有可能的傳染病測(cè)定，因此為了降低輸血傳染的危險(xiǎn)性，對(duì)獻(xiàn)血員樣本進(jìn)行新喋呤測(cè)定是有意義的。 測(cè)定新喋呤的其它診斷應(yīng)用有：
●重復(fù)損傷的ICU病人
●用于預(yù)測(cè)HIV感染和惡性疾病
●移植手術(shù)后病人并發(fā)癥的早期預(yù)測(cè)
●自身免疫性疾病、疾病活動(dòng)的指征
●病毒感染的診斷
●急性病毒和細(xì)菌感染的鑒別診斷
●慢性感染復(fù)發(fā)和免疫刺激治療的監(jiān)測(cè)
新喋呤試劑盒檢測(cè)原理 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用固相的競(jìng)爭(zhēng)ELISA原理。樣本中的抗原和酶標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)抗體的結(jié)合位點(diǎn)（兔抗新喋呤）。抗原-抗體復(fù)合物連結(jié)到包被了羊抗兔抗體的酶標(biāo)板上。未連結(jié)的抗原經(jīng)洗滌步驟除去。底物反應(yīng)后形成的顏色強(qiáng)度與樣本中抗原的量成反比例關(guān)系。樣本的濃度可以直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出。
新喋呤試劑盒組成成分
| 名稱(chēng) | 數(shù)量 | 成分 | | 微孔板 | 12×8 | 微孔中包被了羊抗兔IgG（多克?。?/span> | | 抗血清 | 1×8ml | 即用型、含抗血清（兔）、磷酸鹽緩沖液、穩(wěn)定劑 | | 酶聯(lián)物 | 1×13ml | 即用型 | | 標(biāo)準(zhǔn)品A~F | 6×1.5ml | 濃度：0、1.35、4.0、12.0、37.0、111nmol/L
即用型、含新喋呤、磷酸鹽緩沖液、穩(wěn)定劑 | | 質(zhì)控1+2 | 2×1.5ml | 即用型、濃度/可接受范圍見(jiàn)質(zhì)控單 | | 分析緩沖液 | 1×21ml | 即用型、含磷酸鹽緩沖液、BSA、穩(wěn)定劑 | | 洗滌液 | 1×50ml | 20倍濃縮、含吐溫、穩(wěn)定劑 | | 底物液 | 1×19ml | 即用型，緩沖液、穩(wěn)定劑 | | 終止液 | 1×19ml | 即用型、含1M硫酸 |
所需材料（未提供）
1、移液器，體積10、50、100、1000ul
2、混合器
3、定軌振蕩器（500rpm）
4、8通道移液器，帶加樣槽
5、洗滌瓶，自動(dòng)或者半自動(dòng)洗板機(jī)
6、450nm酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)為600-650nm）
7、雙蒸水或去離子水
8、吸水紙，吸頭和計(jì)時(shí)器
儲(chǔ)存條件
新喋呤試劑盒運(yùn)輸和儲(chǔ)存的溫度為2~8℃。避免直接的光照和加熱。微孔板拆封后保存在密封袋中2~8℃，可以穩(wěn)定至有效期。
樣本稀釋
血清、血漿
不需要稀釋?zhuān)苊怅?yáng)光直接照射
尿液
使用分析緩沖液按1:101稀釋
如10ul+1000ul，避免陽(yáng)光直接照射
樣本的濃度高于蕞高標(biāo)準(zhǔn)品的，必須進(jìn)一步稀釋。
新喋呤試劑盒檢測(cè)步驟
1、移取20ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、血清、血漿和稀釋的尿液樣本至相應(yīng)的孔中。
2、每孔加入100ul的酶聯(lián)物。
3、每孔加入新喋呤抗血清50ul。
4、蓋板，避光在振蕩器（500rpm）、室溫（18~25℃）下溫育90分鐘。
5、移去封板紙，倒出孔中溶液，洗板4次，每次每孔使用300ul稀釋的洗滌液。在吸水紙上拍干。
6、對(duì)于底物液和終止液的使用，建議使用8通道的移液器，確保每孔加入的時(shí)間間隔是相同的。避免氣泡的產(chǎn)生。
7、每孔加入150ul的底物液。
8、室溫（18~25℃）下溫育10分鐘。
9、每孔加入150ul的TMB終止液終止反應(yīng)。輕輕震動(dòng)包被板使溶液混勻。
10、在15分鐘內(nèi)于450nm的酶標(biāo)儀上讀數(shù)（參考波長(zhǎng)是600~650nm）。
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