細胞因子檢測是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內(nèi)皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經(jīng)刺激而合成(一般是免疫細胞)、分泌的一類生物活性物質(zhì)分泌的蛋白質(zhì),在體內(nèi)廣泛參與免疫調(diào)節(jié)及炎癥反應、組織修復、刺激造血系統(tǒng)、刺激細胞的增殖與凋亡等重要生理活動,在抵抗外來病原及維持機體內(nèi)環(huán)境平衡中均起重要作用。
細胞因子檢測均為蛋白或多肽,具有較強的抗原性。隨著重組細胞因子的出現(xiàn),可較方便地獲得細胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體,因此可利用抗原抗體特異性反應的特性,用免疫學技術(shù)定量檢測細胞因子。
生物學測定法的原理是根據(jù)細胞因子對特定的依賴性細胞株(即靶細胞)的促增殖作用,以增殖細胞中的DNA的合成或酶活性為指標,間接推算出細胞因子的活性單位,如對IL-1、IL-2等細胞因子活性的檢測。亦可根據(jù)某些細胞因子對特定靶細胞的殺傷效應或?qū)Σ《镜囊种谱饔眠M行測定,如對腫瘤壞死因子及干擾素的生物活性測定。
分子生物學測定法是目前采用的技術(shù)有各種印跡法、斑點雜交、原位雜交和PCR等。通過檢測細胞內(nèi)細胞因子的基因組成或mRNA量,推算出細胞因子的合成量。
在實際應用中,可根據(jù)各自的實驗目的和實驗室條件進行選擇。生物學檢測法比較敏感,又可直接測定生物學功能,是zui可靠的方法,適用于各種實驗目的,是科研部門zui常用的技術(shù),但需要長期培養(yǎng)依賴性細胞株,檢測耗時長,步驟繁雜,影響因素多,不容易熟練掌握。