一：運用注意事項
1. ELISA檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗刷液也許會有結晶分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響效果。
3. 嚴峻按說明書的操作進行，試驗效果斷定有必要以酶標儀讀數(shù)為準。
4. 本試劑不一樣批號組分不得混用。
5. 封板膜只限一次性運用，以避免交叉污染。
6. 全部樣品，洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
7. 底物請避光保存。
二：操作程序
1. ELISA檢測試劑盒分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl；在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品后稀釋度為5倍）。每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。輕輕晃動混勻，37℃溫育60分鐘。
2. 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。
3. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
4. 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
5. 測定：以空白孔調零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
6. 根據(jù)ELISA檢測試劑盒免費代測標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應該乘以總稀釋倍數(shù)。
